蛋白质与肽链测序技术概览
肽链测序是一种确定蛋白质或肽的氨基酸序列的方法。蛋白质是由20种不同的氨基酸通过肽键链接而成的长链。通过测序可以确定这些氨基酸的确切顺序,从而了解蛋白质的结构和功能。肽链测序的主要方法有两种:Edman 降解法和质谱法。
1.Edman 降解法:
这种方法是通过逐个地从蛋白质或肽的N端移除氨基酸来确定其序列的。
在每一步中,N端的氨基酸与Edman试剂反应,形成一个可识别的衍生物,然后该氨基酸被切除,进行下一轮的反应。
这种方法可以连续测序大约20-30个氨基酸。对于较长的蛋白质,需要先将其切割成较短的肽段,然后分别测序。
2.质谱法:
质谱法是目前用于蛋白质和肽测序的主要技术。
肽或蛋白质首先被离子化,然后通过质谱仪分析。
质谱仪可以测量离子的质量/荷比,从而确定氨基酸的序列。
与Edman降解法相比,质谱法可以分析更长的肽链,并且速度更快、灵敏度更高。
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