未知蛋白质N端测序

    对于未知或不确定理论序列的蛋白,可以使用N端测序的途径提供确证的关键信息。蛋白质N端测序的方法主要可分为质谱法和非质谱法两类,非质谱法主要以经典的Edman降解法为主。质谱法测序是基于已知的质谱数据库进行检索匹配,其不能用于未知蛋白N端测序。因此,可通过Edman降解法来实现未知蛋白质N端测序,其策略是通过化学循环反应从未知蛋白的N端开始逐个鉴定游离出的氨基酸残基类型,从而确定未知蛋白的N端序列。

     

    Edman降解法测定未知蛋白N端序列是通过弱碱条件下蛋白/肽段与异硫氰酸苯酯(PITC)反应,再用酸处理使肽段上的氨基末端残基以PITC衍生氨基酸的形态游离出来,同时暴露出肽段序列中第二个氨基酸残基的α-氨基,依次循环Edman降解的化学反应,并逐个鉴定PITC衍生氨基酸游离出的氨基酸残基,从而确定未知蛋白肽段氨基酸序列。

     

    百泰派克生物科技采用岛津公司Edman测序系统,为广大科研工作者和科研客户提供基于Edman降解的蛋白质N端测序服务。采用我们的测序系统,可以测定N端30个氨基酸的序列信息。采用特定的蛋白上样系统,可以测定N端的60-70个氨基酸。百泰派克生物科技也建立了以先进的LC-MS/MS技术进行N-端测序的平台,可以测出封闭和修饰的蛋白质末端,与基于Edman降解的蛋白质N端测序形成互补,保证N端测序服务的顺利进行。

     

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