N糖检测原理
随着蛋白质糖基化修饰的深入研究,蛋白质N-糖基化(也称作N糖)的检测也越来越广泛。N糖是由14个单糖(Glc-3-Man-9-GlcNAc-2)与蛋白质上天冬酰胺(Asn)的NH2以N-糖苷键的形式共价连接形成。目前,质谱(MS)已成为N糖检测的首选方法,通常使用质谱法对N糖进行检测。
N糖检测原理是将N糖从特定糖基化修饰后的糖蛋白中释放,得到的糖链经过基质辅助激光解吸电离(MALDI)和电喷雾电离(ESI)进行电离,生成不同质荷比(m/z)的带正电荷的离子,经过加速电场或磁场的作用分离得到具有不同质荷比的质谱图。然而,聚糖在电离过程中容易产生糖苷键裂解所产生的碎片离子。因此,可通过N糖衍生化(如甲基化)来提高质谱检测灵敏度,并在质谱检测过程中产生更多结构相关的碎片离子。
百泰派克生物科技采用MALDI TOF MS高分辨质谱系统和UHPLC技术提供N-糖分析服务,该服务可用于鉴定血浆/血清、细胞、组织或生物体表达的全部N-糖,所有与蛋白质连接的聚糖都将通过酶消化水解,通过亲水色谱法分离后,使用质谱系统进行定量分析。您只需将实验目的告知并将样品寄出,我们将负责项目后续所有事宜,包括蛋白提取、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
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