wb目的条带连成一条,内参正常,可能原因
如果您的 WB(Western Blot)目的条带连成一条,但内参正常,可能的原因包括:
1.过度加载样本:
如果您加载的目标蛋白质样本过多,它们的条带可能会连成一条,因此请确保加载适量的样本。
2.抗体亲和力过强或浓度过高:
使用的一抗或二抗过于亲和或浓度设置得过高,导致过度染色。
3.过度迁移时间:
迁移时间过长可能会导致条带的扩散和连成一条,因此请确保迁移时间适当。
4.蛋白质浓度不均匀:
如果样本中的目标蛋白质浓度不均匀,某些部分可能会形成浓度较高的连续条带。尝试在样品制备阶段更好地均匀混合蛋白质。
5.阻塞不充分或过度洗涤:
如果阻塞步骤不充分或洗涤步骤过度,可能导致非特异性结合或信号过强。
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