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Western Blot(WB)实验中,蛋白的上样量通常建议在20μg-30μg之间,因为这个量级通常能保证足够的蛋白量以获得清晰的条带,同时又不至于过多导致信号饱和或条带模糊。如果蛋白量过多,可能导致信号过强、条带模糊,甚至可能出现条带堆积的现象;如果蛋白量过少,则可能导致信号弱,难以检测到目标蛋白。
此外,蛋白上样量也与WB的具体测定目的有关。例如,当研究低丰度蛋白或进行定量分析时,可能需要调整蛋白的上样量以获得最佳结果。
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