蛋白质甲基化检测常用方法?

蛋白质甲基化是一种重要的翻译后修饰过程，涉及将甲基转移酶（如蛋白质精氨酸甲基转移酶和蛋白质赖氨酸甲基转移酶）通过将甲基基团（来自S-腺苷甲硫氨酸）转移至蛋白质的氨基酸残基（主要是精氨酸或赖氨酸）上，从而影响蛋白质的功能和活性。检测蛋白质的甲基化状态是生物学研究和疾病诊断中的关键步骤。以下是几种常用的蛋白质甲基化检测方法：

1.西方印迹（Western Blot）分析：

这是一种常用的方法，用于检测特定蛋白质在样品中的存在和量。使用针对甲基化位点的特异性抗体，可以通过这种方法检测蛋白质的甲基化状态。

2.质谱分析：

质谱分析是一种强大的工具，能够鉴定蛋白质甲基化的确切位置。通过与计算机数据库中的已知质谱图谱比较，可以鉴定出蛋白质样品中的甲基化位点。

3.免疫共沉淀（Immunoprecipitation, IP）和色谱技术：

通过使用特异性抗体结合目标蛋白，然后将蛋白-抗体复合物从混合物中分离出来，可以富集甲基化蛋白。进一步可以通过液相色谱和气相色谱分析这些蛋白。

4.酶联免疫吸附测定（Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）：

这是一种用于检测特定抗原（例如甲基化蛋白）存在和量的高通量方法。特异性抗体用于检测和定量甲基化程度。

5.荧光共振能量转移（FRET）：

通过使用荧光标记的抗体，FRET可以在活细胞中实时监测蛋白质的甲基化状态。

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