17k的蛋白在western blot转膜的时候电流和时间要多少?对pvdf膜有什么要求?
Western blot转膜时电流和时间的设置是根据所转膜的蛋白的大小和性质来确定的。对于17kDa的蛋白来说,可以参考以下建议:
1.电流设置:
一般来说,较低的电流可以减少蛋白的热失活和电泳缓冲液的蒸发。对于小分子量的蛋白,常见的电流设置为20-30 mA。
2.转膜时间:
转膜时间的设置也与蛋白的大小有关。对于17kDa的蛋白,通常转膜时间为30-60min。
3.PVDF膜要求:
一般建议使用0.2或0.45微米的孔径的PVDF膜。
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