怎样检测蛋白质糖型
蛋白质糖基化是一种广泛且重要的翻译后修饰,蛋白质经糖基化修饰合成糖蛋白,糖蛋白上所结合的糖链种类和结构称之为糖型,糖基化修饰糖型主要可分为N-糖和O-糖。
糖型的检测与鉴定是理解糖链、糖蛋白功能以及糖基化修饰过程的前提之一。怎样检测蛋白质糖型?通常可选择液相色谱质谱联用(LC-MS)技术或基质辅助激光解吸-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对蛋白质糖型进行鉴定及相对定量分析。
蛋白质糖型检测思路:经过糖基化修饰的糖蛋白首先经过化学法(hydazinolysis)或酶解法(如糖苷酶)将目标糖蛋白中的糖链释放出来。根据糖链的复杂程度,选择使用LC-MS或MALDI-TOF-MS对释放的糖链进行糖型鉴定与分析。通过糖型数据库比对分析进行糖型鉴定,并根据糖链的质谱峰面积分析糖型的相对含量。此外,对释放出来的糖链的还原型末端进行荧光标记,通过分析荧光标记的糖链也可进行糖型的相对定量。
百泰派克生物科技提供基于MALDI-TOF MS和LC-MS系统的糖型分析服务,该服务可用于鉴定血浆/血清、细胞、组织或生物体表达的全部糖基化修饰,并针对糖基化蛋白中的糖型进行鉴定以及糖型含量的相对定量检测。您只需将实验目的告知并将样品寄出,我们将负责项目后续所有事宜,包括蛋白提取、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
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