糖基化肽段分析
- NanoLC: Vanquish NEO
- MS: Orbitrap Fusion Lumos With ETD
糖基化是一种常见的蛋白质翻译后修饰(Post-translational Modification, PTM),它对于蛋白质的功能和稳定性有着重要的影响。糖基化肽段是指糖链连接在肽段上的形式,包含了肽段的氨基酸信息、完整的糖链信息以及糖链和肽段结合位点的信息。糖基化肽段分析是蛋白质功能调控、药物研发、生物工程和生物制药等研究领域广泛应用的技术,分析糖基化肽段可以提供关于糖基化肽段的质量、电荷状态、连接位置和糖链结构等详细信息,对于深入理解糖基化调控的机制也具有重要意义。

图1 糖基化分析流程图
百泰派克生物科技BTP通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证。公司基于液质联用的高分辨质谱平台开发了对特定糖蛋白完整意义上的糖基化分析方法,为您提供高质量的一站式糖基化肽段分析服务,精准解析糖基化修饰类别、糖基化位点修饰效率、糖基化位点各种糖型比例。欢迎免费咨询,了解更多详情!
实验仪器
技术应用
针对糖基化肽段的分析可实现对特定糖蛋白全面的糖基化分析,得到的信息包含:
1.糖基化位点的定位,即蛋白质中哪些位点发生了糖基化修饰;
2.区分N糖基化位点和O糖基化位点,以确定糖链修饰的类型;
3.获取每个N糖基化位点对应的糖链组成、结构和相对含量信息;
4.获取每个O糖基化位点对应的糖链组成和相对含量信息;
对上述信息进行统计和总结,可以进一步分析和解释糖蛋白的糖基化特征。
案例示意
1.糖基化修饰类别
| Type | Position | Glycans NHFAGNa | Modification Type(s) | Score | Intensity | Percentage(%) |
| N-Glyco | 15 | HexNAc(5)Hex(3)Fuc(1) | N[+1648] | 531.64 | 392950000 | 64.56 |
| HexNAc(2)Hex(7) | N[+1541] | 521.07 | 215691739 | 35.44 | ||
| 26 | HexNAc(2)Hex(5) | N[+1216] | 596.96 | 3825409478 | 66.12 | |
| HexNAc(2)Hex(8) | N[+1703] | 437.45 | 1214599000 | 21.00 | ||
| HexNAc(2)Hex(6) | N[+1378] | 426.73 | 745143899 | 12.88 | ||
| 75 | HexNAc(2)Hex(5) | N[+1216] | 685.20 | 4125796520 | 100.00 | |
| 103 | HexNAc(2)Hex(5) | N[+1216] | 744..04 | 2256398640 | 48.81 | |
| HexNAc(2)Hex(8) | N[+1703] | 623.99 | 1154076000 | 24.96 | ||
| HexNAc(2)Hex(7) | N[+1541] | 601.27 | 1212540000 | 26.23 | ||
| 116 | HexNAc(2)Hex(5) | N[+1216] | 528.10 | 188561000 | 100.00 | |
| O-Glyco | 41 | HexNAc(2)Hex(3)Fuc(1) | T[+1038] | 563.23 | 314565000 | 100.00 |
| 67 | HexNAc(3)Hex(3)Fuc(1) | S[+1241] | 702.63 | 15243000 | 100.00 | |
| 133 | HexNAc(2)Hex(3)Fuc(1) | S[+1038] | 628.96 | 632560000 | 47.82 | |
| HexNAc(4)Hex(3)Fuc(1) | S[+1445] | 476.50 | 654870000 | 49.51 | ||
| HexNAc(6)Hex(3)Fuc(1) | S[+1851] | 411.28 | 35254313 | 2.67 |
表1 糖基化修饰类型统计
注:Type:糖基化修饰类型;Position:糖基化位点在蛋白中的位置;Glycans NHFAGNa:糖基化修饰的糖型;Modification Type(s):糖型的分子量;Score:蛋白打分值;Intensity:蛋白的相对丰度;Percentage %:该种糖型在各自对应的位点的总糖型中所占的比例。
2.糖基化位点修饰效率

图2 糖基化效率统计图
注:糖基化效率(%)=(同一位点含糖基化的肽段相对含量之和/不含糖基化的肽段相对含量之和)* 100
3.每一个糖基化位点各种糖型比例

图3 糖型比例
注:图中为某一位点含有的N糖糖型和占比,横坐标为糖型,纵坐标为糖型的占比
4.蛋白糖基化修饰信息汇总图

图4 糖基化信息汇总
注:图中为每个位点上含量前三的糖
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1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 糖基化肽段分析详细信息
4. 质谱图片
5. 原始数据
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