Edman反应鉴定N端残基
Edman降解是从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程,利用Edman化学反应从蛋白质的N末端将α残基依次降解再对氨基酸进行鉴定。
Edman降解方法只能用于鉴定蛋白质和多肽的N-末端氨基酸残基。该方法需要对N端α残基氨基酸进行化学修饰(苯异硫氰酸酯修饰),然后从肽上切割该氨基酸,再经层析或色谱法(如HPLC)鉴定被切割的氨基酸,余下的多肽链(少了一个残基)保持完整并被回收进行下一轮降解循环。Edman降解是确定纯化肽氨基酸序列的第一种方法,到目前为止,因为该方法需要高度纯化的肽,所以大规模并行的方式进行此类测序还是不可行的。
常规N端氨基酸检测用Edman降解法进行检测,但是蛋白质或者肽链样品中有时候会出现N末端环化的现象,在这种情况下用Edman降解法需要先进行去封闭处理,然后才能开始Edman降解法进行氨基酸序列的测序。
百泰派克生物科技采用岛津公司Edman测序系统,为广大科研工作者和科研客户提供基于Edman降解的蛋白质N端测序服务。采用我们的测序系统,可以测定N端30个氨基酸的序列信息。采用特定的蛋白上样系统,可以测定N端的60-70个氨基酸。百泰派克生物科技也建立了以先进的LC-MS/MS技术进行N 端测序的平台,可以测出封闭和修饰的蛋白质末端,与基于Edman降解的蛋白质N端测序形成互补,保证N端测序服务的顺利进行。
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