蛋白质质谱定性定量
对蛋白质进行定性定量鉴定即对目标蛋白的种类和含量进行鉴定是蛋白质组学研究中最基本的研究内容。质谱技术是目前常用的蛋白质组学分析技术,它基于蛋白肽段离子的质荷比(m/z)和离子峰强度信息可实现蛋白质的定性和定量鉴定。
在质谱分析中,蛋白质先被酶解消化为小分子的肽段,小分子肽段在离子源中电离成肽段母离子,再利用质量分析器检测肽段母离子的质荷比和离子峰强度。将肽段离子的质荷比数据与理论数据库进行比较、匹配可以确定其分子质量,进而获得该肽段的氨基酸组成,通过各肽段之间的拼接最后确定完整蛋白的分子量和氨基酸组成信息以实现定性鉴定。肽段母离子的浓度与样品量成正相关,样品量越多,其产生的肽段离子就越多,相应的离子峰信号强度就越大,因此可以利用离子峰信号强度进行蛋白的含量测定。若引入已知浓度的标准品(内标肽)还可以对蛋白进行精确的含量测定。
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