pull down和免疫共沉淀

    Pull Down与免疫共沉淀都是用于蛋白质与蛋白质相互作用的分析方法,二者在原理上存在差异。免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)通过使用靶蛋白特异性抗体来间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白,从而识别生理相关的蛋白-蛋白相互作用,进一步分析这些蛋白质复合物可以鉴定新的结合蛋白、结合亲和力、结合动力学以及靶蛋白的功能。Co-IP是免疫沉淀(IP)的延伸,原理也与IP相同,只是与抗原相结合的蛋白质也被沉淀下来。因此,一个实验是否被称为IP或Co-IP取决于实验的焦点是主要目标(抗原)还是次要目标(相互作用蛋白质)。Co-IP常用于分析多种蛋白质的相互作用及其功能,抗体的选择对Co-IP是否成功至关重要。因此,在实验前应该准确预测与靶蛋白相互作用的蛋白质。

    Pull Down是一种类似于免疫沉淀的亲和纯化技术,只是使用“诱饵”蛋白代替抗体。亲和层析(即亲和纯化)方法大大提高了蛋白质纯化的速度和效率,同时提供了对潜在蛋白结合体进行下拉或共纯化的技术平台。在Pull Down分析中,将被亲和试剂标签标记的诱饵蛋白固定在固体基质上,从而产生用于纯化与诱饵蛋白相互作用的其他蛋白的“二级亲和载体”。然后将含有诱饵蛋白的二级亲和支持物与含有假定的“猎物”蛋白质的蛋白质混合物如细胞裂解物一起孵育,可与该诱饵蛋白相互作用的“猎物”蛋白便被捕获。

    百泰派克生物科技使用Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪结合Nano-LC,提供基于Pull Down和Co-IP的蛋白质相互作用分析服务技术包裹,可以鉴定两种已知的感兴趣蛋白质可能存在的直接相互作用、寻找可能与目标蛋白存在相互作用关系的未知蛋白,欢迎免费咨询。

    相关服务:
    Pull down靶蛋白质谱鉴定
    蛋白与蛋白互作分析:Co-IP与Pull-down
    GST pull-down蛋白相互作用分析
    CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析
    SILAC与免疫共沉淀结合质谱联用的蛋白互作分析
    蛋白互作分析
    蛋白质相互作用质谱分析
    交联法蛋白相互作用分析
    Far-Western Blot分析
    标记转移法蛋白相互作用分析

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