pull-down实验和免疫共沉淀足够证明分子互作吗
Pull-down实验和免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)都是研究蛋白质分子相互作用的常用方法。根据二者的实验原理可知,理论上是可以证明蛋白质与蛋白质之间的相互作用的。
但是,根据两种技术的局限性也不难排除以下情况:Co-IP可能无法检测到蛋白质之间的低亲和力或短暂的相互作用;再者检测结果不能确定交互作用是直接的还是间接的,因为不能排除其他蛋白在中间起桥梁作用的可能性。而Pull-down受外界条件影响较大,并不能真正反映蛋白质在真实生理状态条件下的相互作用,因为它们在体外相互结合并不意味着它们在体内有生理结合。
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