未知蛋白测序

    蛋白质的氨基酸序列是决定蛋白质结构和功能的基础,蛋白测序即对组成蛋白质的氨基酸种类和排列顺进行测定,是蛋白组学研究中的重要内容,常见方法包括质谱法(如串联质谱)和Edman降解法。未知蛋白(unknown protein)通常是指那些尚未被充分研究和描述的蛋白质。这些蛋白质可能是由新发现的基因编码的,或者是已知生物体中的基因产物,但其结构、功能和作用尚未被完全理解。未知蛋白测序有助于揭示生物体的基因组和蛋白质组的全貌对于研究蛋白质结构与功能,促进生物技术、药物开发和疾病诊断等领域的进步具有关键意义。

    百泰派克生物科技BTP基于Thermo公司最新推出的Obitrap Exploris 240质谱仪实现未知蛋白样品的序列分析,采用常用的6种蛋白酶(Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N)分别对靶蛋白进行酶切和质谱测定,在得到碎裂肽段片段的同时,经过肽段之间的拼接完成蛋白序列100%的测定。

    百泰派克生物科技BTP未知蛋白测序流程

    1.样品准备:

    提取蛋白质,并通过纯化过程去除杂质。


    2.蛋白分级/分离:

    将蛋白质样品进行分级或分离,通常采用一维或二维凝胶电泳(1D/2D-PAGE)以及液相色谱(如HPLC)等方法。


    3.蛋白酶切/消化:

    通过多重酶解(如Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N将蛋白质分解成较小的肽段,便于后续进行质谱分析


    4.肽段分离:

    采用液相色谱(如反相高效液相色谱,RP-HPLC)将蛋白酶切后得到的肽段进一步分离。


    5.质谱分析:

    将肽段通过质谱仪进行分析,质谱分析的结果可以获得肽段的质量、电荷状态等信息。


    6.肽段测序:

    通过串联质谱(如MS/MS)对肽段进行进一步的测序。


    7.数据处理与分析:

    使用专门的质谱软件如Mascot、Sequest 等结合已知的蛋白质数据库对质谱数据进行分析处理。


    未知蛋白测序技术的主要应用

    1.新蛋白质的发现:

    通过对未知蛋白质的测序和功能注解,可以发现新的生物催化剂、信号传导蛋白、转录因子等分子功能。


    2.蛋白质功能研究:

    通过测序蛋白质,为功能注释和蛋白质互作用网络研究提供数据支持。


    3.疾病标志物发现

    通过对病理和正常组织蛋白质组的比较,发现潜在的疾病标志物,为疾病诊断和治疗提供线索。


    4.药物研发:

    用于鉴定药物作用的靶标蛋白,找到新的药物靶点有助于加速新药的研发和优化。


    关于样品

    我们接受以下类型的样品:

    1.纯化蛋白质:请提供纯度大于85%的蛋白质样品,建议送样量为50-200ug,蛋白浓度应在0.1-1mg/mL之间


    2.蛋白质组提取物:包括但不限于来源于细胞、组织或生物体的蛋白质组提取物。建议送样量为200-500ug,蛋白浓度应在1-5mg/mL之间。


    3.蛋白胶点/胶条:1D-SDS PAGE分离的蛋白胶条,2DE PAGE中的蛋白胶点,IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull-down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物。对于胶点胶条请保证蛋白质含量至少为10ng,对于免疫沉淀样本,请提供至少20ug的蛋白质。


    中/英文项目报告

    在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:

    1. 实验步骤(中英文)

    2. 相关的质谱参数(中英文)

    3. 未知蛋白测序详细信息

    4. 质谱图片

    5. 原始数据


    未知蛋白测序一站式服务

    您只需下单-寄送样品

    百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告


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    从头测序

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