蛋白纯化——我感兴趣的蛋白质在纯化过程中“消失”了,我该怎么办?

    这种情况可能是由于:1、蛋白质已被蛋白酶降解——向样品和缓冲液中添加蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解消化;或通过 Benzamidine Sepharose 4 Fast Flow 等介质运行样品以去除胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶。2、样品制备过程中蛋白质吸附至过滤器——使用不同膜类型的过滤器。 再生纤维素、PVDF 和 PES 通常表现出低蛋白质结合,也是确定最适合的膜类型的良好选择。


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