如何验证肽的结构和纯度?

    合成肽的纯度要求取决于需求。对于某些实验或用途,肽的纯度并不重要。然而,在其他情况下,可能需要高纯度、无外消旋化、缺失或侧链修饰的肽。从历史上看,薄层色谱(TLC)和分析型反相高效液相色谱(HPLC)曾用于检测纯度以及纯化策略是否有很高的成功概率。例如,如果在使用分析型 HPLC 时色谱图中的所有峰都被广泛分离,则低压反相 HPLC 也可以很好的工作。然而,在使用自动固相肽合成 (SPPS) 的高通量设置中,通常使用高压制备型 HPLC。现在更常规地使用基于MALDI-TOF-MS和 LC-ESI-MS(MS) 的方法。验证合成肽的结构和纯度的首选技术有:氨基酸分析和质谱法。然而,没有一种单一的生物分子表征技术或程序是万无一失的,建议使用多种技术来分析最终产品。


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