如何准备用于翻译后修饰分析的复杂混合物样品(如细胞系/组织)?
对于深度磷酸化蛋白质组学,样品制备通常由客户进行,并且在磷酸化富集前或后将消化蛋白质直接提交用于的 LC-MS / MS 分析。我们可根据您的特定需求提供样品制备。请在提交样品之前与我们联系以讨论您的需求。 仅 LC-MS/MS 分析:我们要求每个样品至少 5 μg 磷酸化蛋白。注意:在分析之前必须执行脱盐步骤。我们强烈建议使用 4h 梯度来最大化磷酸肽的鉴定数量。 磷酸化富集和分析:由于通常检测到的被磷酸化的肽小于1%,因此我们至少需要 200μg 的总消化蛋白质。我们使用 TiO2 或 FeIMAC 进行磷酸化富集。 注意:PEG,甘油和洗涤剂不适合进行质谱分析,必须在提交样品之前去除。我们可以尝试对较低体积/浓度的样品进行分析,但不能保证结果。
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