SILAC与iTRAQ谁更适合用于定量分析酵母蛋白质组?
二者各有优势,也有缺点,应根据实验侧重点进行选择。SILAC的优势:1、将差异标记的蛋白质合并并加工在一起,最大限度地减少由于处理错误引起的偏倚;2、氨基酸修饰介质不影响细胞的代谢过程;3、定量很简单,因为预先知道肽与其较重版本之间的预期质量差;4、在SILAC培养基中培养5-6代后,体内标记是准确和完整的,无需优化标记。SILAC的缺点:1、培养过程耗时;2、有些样品不能通过培养过程获得;3、有些细胞类型不能容纳某些氨基酸。iTRAQ优势:1、特别适用于比较研究;2、能够在相对较短的时间内识别和量化蛋白质组;3、可鉴定的蛋白质丰度动态范围大;4、在一次分析中可以鉴定和定量数千种蛋白质/肽;5、可检测到翻译后修饰;6、可以识别任何类型的蛋白质,包括高分子量蛋白质、酸性蛋白质和碱性蛋白质。iTRAQ缺点:1、样品必须按照非常严格的流程准备;2、iTRAQ仅提供相对定量,故只能比较相对丰度。
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