如何从凝胶中切出蛋白质条带?

    从凝胶中切出蛋白质条带时应格外小心!首先,采取一切预防措施避免凝胶与裸手或任何潜在的脏表面直接接触,例如灯箱、刀片或用过的容器。您可能需要戴上干净的手套,将凝胶放在干净的塑料薄膜(例如 Sara Wrap)上,然后将其放在灯箱上,使用干净的刀片和凝胶容器。请记住,即使是一小块人体皮肤也可能含有比凝胶条带中的蛋白质多一百倍的角蛋白。其次,要切出的凝胶片的大小应接近该蛋白质条带的大小。凝胶尺寸过小意味着珍贵样品的损失,而凝胶尺寸过大可能会降低胶内消化肽的产量。蛋白条带被切除后,小心地将其转移到干净的 500 μl Ep管中。盖上管子,贴上标签;并用封口膜包裹它以防止凝胶片干燥(您也可以添加约10 μl 的1% 乙酸/水以防止其干燥)。如果您需要切几条带,请一条一条地剪下来,以免这些凝胶条带被错误标记。这样的错误将很难追查。


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