对于蛋白质鉴定,我们需要在运行 SDS PAGE 之前浓缩样品吗?
这取决于如果蛋白质样品的浓度约为 100 fmole/μl,则每条泳道上样 10μl 应该会产生每条泳道大约 1pmol 的蛋白质。大于1 pmol 的蛋白质条带可以通过几种类型的染色剂(考马斯胶体、Zn、Cu 等)可视化,并且在这种凝胶条带中鉴定蛋白质对我们来说通常不是很难。然而,通常情况下,通过微量纯化程序制备的蛋白质样品的体积远大于凝胶电泳所能装载的体积。如果此类样品中的蛋白质总量非常低,则将样品浓缩至可加载到 1-3 个凝胶泳道(总共 10-30 μl)的体积可能是增加凝胶上蛋白质可视化机会并由我们鉴定蛋白质的最佳方法。
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