为什么预染蛋白标记物的表观分子量值在不同凝胶类型中不同?
当蛋白质与带电荷的染料分子共价结合时,会影响蛋白质的总电荷。改变蛋白质的电荷很可能会改变它在凝胶中的流动性。这就解释了为什么预染色的蛋白质标记被赋予“表观”分子量值,而常规未染色的蛋白质标记被赋予真实分子量。数据卡和其他参考文献上预染色蛋白标记物的表观分子量状态是用 10-20% Tris-Glycine凝胶测定的。据观察,当在不同的凝胶类型(Tris-tricine、Bis-Tris 等)上运行时,表观分子量似乎“不正确”。造成这种差异的原因是凝胶类型的不同配方(缓冲剂、离子强度和 pH 值)。
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