什么是 SDS-PAGE 凝胶?什么是还原条件与非还原条件?

    SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate – polyacrylamide gel electrophoresis)是一种按质量分离蛋白质的方法。SDS 是一种离子型去污剂,可以变性并结合蛋白质,使蛋白质带上均匀的负电荷。这意味着当向聚丙烯酰胺凝胶施加电流时,与 SDS 结合的蛋白质将沿凝胶向下迁移到带正电的电极,蛋白质仅按大小分离。 在 SDS-PAGE 凝胶上运行之前,可以还原蛋白质。在还原条件下,加入 β-巯基乙醇(β-ME 或 2-ME)或二硫苏糖醇(DTT),这减少了蛋白质中的二硫键,因此当它们在凝胶上运行时,可以更好地按大小分开。许多生长因子是二硫键连接的二聚体,在与还原蛋白相同的凝胶上运行非还原蛋白可以确认正确的二聚体状态。


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