是否可以在将样品上样到SDS凝胶上之前用TCA沉淀样品以增加蛋白质浓度?

    在上样到1D凝胶之前,存在不同的方法来增加蛋白质浓度,包括透析、微滤、沉淀和色谱。您可以使用TCA沉淀,但TCA是一种强大的酸,可能导致某些蛋白质的水解和碎裂。通常经常使用冰冻的乙醇/丙酮进行沉淀,它在增加蛋白质浓度的同时可去除大多数盐和缓冲液成分。具体做法是将样品与冷冻的乙醇以100 ul:400 ul的比例混合并在-20°C下孵育。随后加入400 ul冷冻的丙酮并在-20°C下孵育。 最后将样品离心并用丙酮/乙醇/水(2:2:1)洗涤。


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