蛋白质谱分析—可以使用哪些溶剂?
水、甲醇、乙腈、氯仿、四氢呋喃和二氯甲烷等溶剂通常被接受用于MS分析。应避免使用DMSO和DMF等高粘度样品。样品也可以在MS兼容的缓冲液中提交,用于电喷雾(ESI)或MALDI分析。这些缓冲液包括浓度为10mM或更低的乙酸铵、甲酸铵和碳酸氢铵。与MS相容的酸性添加剂包括乙酸、甲酸和三氟乙酸 (TFA)。避免使用盐、磷酸盐、HEPES、柠檬酸盐或硫酸盐缓冲液、洗涤剂(吐温、Triton、NP-40、SDS)、尿素、甘油、碳水化合物、EDTA、GnHCl、塑料和增塑剂、聚乙二醇 (PEG) 或其他聚合物,因为这些成分会干扰分析物的电离。对于GC-MS分析来说——样品浓度和量:1 mg纯固体、液体或油样品样品足够。溶液样品中含有的缓冲液应适合GC-MS分析,样品不超过1mg/mL。溶剂:GC-MS需要挥发性有机溶剂,如二氯甲烷、己烷、甲醇、乙醚等。GC-MS不能直接分析溶解在水中的样品。注意:某些类别的化合物不适合进行GC-MS分析,包括强酸、强碱、盐、水、金属或聚合材料。还应避免使用塑料小瓶和石蜡膜。对于ESI分析来说——样品浓度和量:纯固体、液体或油样品至少需要0.1mg。溶液中含有的缓冲液应适用于ESI分析,建议提供浓度为50-100μM的样品1.5mL,但也可以用低至100μL的溶液进行分析。溶剂:适用于ESI的溶剂包括甲醇、乙腈以及水、活性剂或甲醇的混合物。注意事项同GC-MS。对MALDI分析来说——样品浓度和量:取决于分析物的质量。对于500-2000Da的纯固体、液体或油样品,通常0.1mg就足够了。对于更高质量的样品,可能需要更多的样品量,具体取决于样品的质量,纯度和类型。应提供至少5μL的溶液,浓度至少为100μM。溶剂:合适的溶剂包括水、甲醇、二氯甲烷、乙腈等。避免:注意事项同GC-MS。
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