HPLC—流动相缓冲液应如何制备？

流动相缓冲液基本上可以通过两种方式制备：1、在与有机改良剂混合之前调节pH。2、在pH调节之前混合缓冲液和有机改良剂。虽然pH值在水性体系中是一个很好定义的参数，但在部分有机溶剂体系中定义或测量质子浓度并不是那么简单。因此建议制备水性缓冲液，调节其pH值，然后与有机改良剂混合。应注意以下几点：（1）缓冲液在pKA的+/-1 pH单位内有效⇒选择正确的缓冲系统；（2）如果高浓度缓冲液与有机溶剂混合，考虑沉淀的风险；（3）使用前始终通过0.4 mm过滤器过滤缓冲液；（4）注意纯水缓冲液中细菌或真菌生长的风险；（5）pH通常随着有机改良剂的加入而改变，无机缓冲液（如磷酸盐）可使pH增加，有机缓冲液（如乙酸酯）可使pH降低。示例：pH7.6的磷酸盐缓冲液⇒添加40%MeOH⇒pH8.5

相关服务: