百泰派克生物科技BTP客户案例：利用Label free定量蛋白组学分析pCSE的蛋白质组成
期刊：Journal of Cellular and Molecular Medicine；影响因子: 5.5650
研究对象：人角膜基质细胞（hCSCs）
研究目的：繁殖hCSCs的新型培养基研究
研究手段：Label free定量蛋白组学等
研究内容及结论：在体外繁殖大量的人角膜基质细胞（hCSCs），同时保持其表型的生理质量，对于其在细胞治疗中的应用是必要的。该研究研究了一种繁殖从飞秒激光小切口角膜基质透镜取出术（SMILE）来源的晶状体中获得的hCSCs的新型培养基，并评估了基质内注射这些hCSCs的可行性。原代hCSCs在猪角膜基质提取物（pCSE）中培养，RIFA培养基包括ROCK抑制剂Y27632、胰岛素-转铁蛋白-硒、成纤维细胞生长因子2、L-抗坏血酸2-磷酸和0.5%FBS（RIFA培养基+pCSE）。采用纳米级液相色谱结合串联质谱（nano LC-MS/MS）对pCSE进行蛋白质分析。在RIFA培养基+pCSE或10%FBS正常培养基（NM）中传代后，将P4处的hCSCs移植到小鼠角膜基质中。与NM相比，ALDH3A1、角蛋白聚糖和基膜聚糖在RIFA培养基+pCSE中表达显著增加。ALDH3A1在RIFA培养基+pCSE中的表达也高于RIFA培养基。纤维连接蛋白和α-SMA在RIFA培养基+pCSE组中的表达低于NM组。通过Metascape分析，pCSE具有抗纤维化、促增殖和抗细胞凋亡活性，有利于hCSC的培养。在RIFA +pCSE培养基中基质内植入的hCSCs注射35天后CD34表达阳性，CD45表达阴性。该研究提供了一种有价值的新培养基，有利于具有生理角质细胞的特性的hCSCs的增殖。在RIFA培养基+pCSE中基质内注射hCSCs具有临床细胞治疗的潜力。
利用Label free定量蛋白组学分析pCSE的蛋白质组成，该服务由北京百泰派克生物科技提供。结果显示，约有740种pCSE蛋白。利用metscape对鉴定蛋白的生物学过程进行分析。pCSE蛋白可能影响的重要生物学过程，包括细胞外基质组织、发育生长、成纤维细胞增殖和凋亡信号通路的调控。
参考文献：Li S, Cui Z, Gu J, et al. Effect of porcine corneal stromal extract on keratocytes from SMILE‐derived lenticules[J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2021, 25(2): 1207-1220.
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