酶解消化蛋白，单独使用及联合使用Asp-N或Glu-C酶的使用方法和用量？之前一直用的胰蛋白酶，按照样品:酶30:1来加

关于Asp-N或Glu-C酶的使用方法和用量，您可以参考下列用法：

一、单独使用Asp-N或Glu-C酶

1.Asp-N:

• 用量: 推荐蛋白与酶的比例为50:1。
• 条件: pH 8.0左右，37°C下酶解，通常进行overnight酶解。

 

2.Glu-C:

• 用量: 推荐蛋白与酶的比例为20:1到30:1。
• 条件: 最佳pH 7.8，37°C下进行overnight酶解。

 

二、联合使用Asp-N和Glu-C酶

1.首先使用Asp-N进行初步酶解，按照上述50:1的比例和条件进行。

2.初步酶解后，加入Glu-C，按照20:1到30:1的比例继续overnight酶解。

 

这种联合使用的方法可以更全面地覆盖蛋白质的潜在切割位点，提高酶解的覆盖率和效率。调整比例和条件可以根据实验的具体需求和酶的性能进行优化。

 

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