pull down实验中缓冲液的配方是什么

Pull-down实验中缓冲液的配方需要根据特定的抗体、靶蛋白和实验条件进行配制和优化。这里为您提供了两种常见的追缓冲液配方及优化策略，您可以根据自己的需求进行调整和尝试：

 

一、基本缓冲液配方

1.TBS加吐温20

• TBS（20 mM Tris, 150 mM NaCl, pH 7.5）
• 吐温20：0.1%（v/v）

 

2. PBS加吐温20

• PBS（10 mM Phosphate, 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, pH 7.4）
• 吐温20：0.1%（v/v）

 

二、缓冲液优化策略

• 增加吐温20的浓度：如果有非特异性结合，可以尝试增加吐温20的浓度到0.5%或更高。
• 改变盐浓度：增加或减少NaCl的浓度，常用范围是从150 mM到500 mM，有助于减少非特异性的蛋白质结合。
• 加入洗涤剂：除了吐温20外，可以考虑使用其他洗涤剂如SDS（0.1%）或NP-40（0.1%）。
• pH值的调整：根据靶蛋白的稳定性和亲和性，调整缓冲液的pH值可能有助于改善洗涤效果。

 

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