做WB时,buffer加多了怎么办

    在进行Western Blot(WB)实验中,如果不小心向缓冲液中加入了过多的Buffer,可能影响蛋白的转移、结合或者信号的检测。解决这个问题的方法取决于具体情况和实验的阶段:

     

    1. 样品制备阶段

    如果是在样品制备阶段加入过多的Buffer,比如裂解缓冲液:

    稀释:可以通过添加更多的样品来稀释过量的Buffer,前提是这样做不会导致蛋白浓度过低,影响后续检测。

    浓缩:使用蛋白浓缩装置如离心浓缩器,移除多余的Buffer,重新调整至所需浓度。

     

    2. 转移缓冲液阶段

    如果是在准备转移缓冲液时添加过多的Buffer:

    重新配制:最直接的方法是重新计算并配制新的转移缓冲液,确保正确的浓度和pH值。

    调整:如果过量不多,可以尝试通过添加其他组分(如水或缺失的其他成分)调整浓度,达到理想的缓冲液比例。

     

    3. 封闭/洗涤缓冲液阶段

    简单调整:这种情况下通常问题不大,可以通过添加额外的水或其他成分来稀释至适当浓度。确保最终的溶液成分与原始要求一致。

     

    4. 抗体稀释

    重新稀释:根据需求重新计算并稀释抗体到正确的浓度。使用新的稀释液以确保抗体的活性和结合特性不受影响。

     

    对于所有情况,重要的是确保在处理过程中密切监测所使用化学物质的量和浓度,以及维持实验条件的严格控制。如果加入过多的Buffer对实验结果产生了不可逆的影响,可能需要重新开始实验。在实验过程中应严格遵循标准操作程序,尽量避免此类错误的发生。

     

    百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商

     

    相关服务:

    蛋白质免疫印迹和电转移服务

    Far-Western Blot分析

提交需求
姓名 *
联系类型 *
联系方式 *
项目描述
咨询项目 *

 

How to order?


/assets/images/icon/icon-rc2.png

客服咨询

/assets/images/icon/icon-message.png

提交需求

https://file.biotech-pack.com/static/btpk/assets/images/icon/icon-wx-2.png

https://file.biotech-pack.com/pro/bt-btpk/image/head/config/20240104-5618-企业微信销售二维码.jpg

联系销售人员

/assets/images/icon/icon-tag-sale.png

促销活动

/assets/images/icon/icon-return.png