无参转录组筛出来的差异基因能直接设计引物跑qpcr吗？都是同一个材料，能直接跑还是需要克隆？

无参转录组筛选出来的差异基因可以直接用于设计引物进行qPCR验证，不必进行克隆。你需要做的是基于差异表达基因的序列信息设计特异性引物，然后在相同的材料中通过qPCR验证这些基因的表达差异。确保引物的设计针对的是转录组数据中鉴定的特异区域，且要验证引物的特异性和效率，以确保qPCR结果的准确性。这个过程通常不需要通过克隆基因来进行。

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