MALDI TOF分子量分析的样本前处理怎么做呀
进行MALDI-TOF MS分析之前,样本的前处理是一个重要步骤,因为它直接影响到分析的质量和准确性。常见的样本前处理步骤包括:
1.样本纯化:
样品需要高度纯化,以减少杂质的干扰,因为它们可能抑制离子化过程或干扰质谱信号。可以通过离心、凝胶过滤或透析等方法去除杂质。
2.样本浓缩:
如果样本浓度太低,可能需要使用浓缩离心管或蒸发等方法浓缩以提高检测的灵敏度。
3.蛋白质或肽的消化(如果需要):
对于蛋白质样本,通常需要进行酶解(如用胰蛋白酶)以产生肽段,便于分析。酶解过程需要精确控制条件,如温度和时间。
4.基质的选择和制备:
选择合适的基质是关键步骤,因为基质会吸收激光能量并将其传递给样品。常用的基质包括α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)、辛酸和二羟基苯甲酸等。基质溶液通常在有机溶剂中制备,如乙酸乙酯、甲醇或乙醇。
5.样本与基质的混合:
将样本与基质溶液混合,通常按一定比例(如1:1)混合。混合后点样到MALDI板上,待自然干燥或通过温和加热。
以上每个步骤都需要精确控制,以确保样本的代表性和分析结果的准确性。此外,样本处理的具体步骤可能根据样本类型和分析目的有所不同。
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