多糖过完纤维柱后不纯，过葡聚糖凝胶柱该怎么过

多糖的纯化通常是一个复杂的过程，涉及多步操作。如果你在使用纤维柱后发现多糖样品不纯，可以考虑使用葡聚糖凝胶柱进行进一步的纯化。下面是使用葡聚糖凝胶柱进行纯化的基本步骤：




1.选择合适的葡聚糖凝胶：

根据你要分离的多糖的大小选择合适的葡聚糖凝胶。例如，Sepharose CL-2B、Sepharose CL-4B和Sepharose CL-6B等。




2.准备葡聚糖凝胶柱：

• 将葡聚糖凝胶与适当的缓冲溶液混合，充分悬浮。
• 轻轻地装载到柱中，避免产生气泡。
• 让凝胶自然沉降，并加入缓冲溶液至柱的顶部。



3.平衡柱体：

• 使用与样品相同的缓冲液通过柱体，以达到平衡。
• 通常需要2-3个柱体容积的缓冲液才能充分平衡。



4.样品准备：

确保你的样品已经通过适当的前处理步骤（例如，去盐、浓缩等）。




5.加载样品：

将样品加载到葡聚糖凝胶柱上（注意不要破坏柱顶的凝胶层）。




6.洗脱：

使用适当的洗脱缓冲液，收集不同的体积分段。根据需要，可以增加梯度洗脱，例如通过逐渐增加缓冲液中的盐浓度。




7.监测和收集亚组：

通常使用紫外检测器来监测洗脱的多糖，并在适当的时间收集洗脱的亚组。




8.分析和验证：

使用适当的分析方法（例如，质谱、HPLC或电泳）来验证你的多糖是否已经被纯化。




在操作过程中，需要注意以下事项：




1.洗脱缓冲液的选择：

确保你的洗脱缓冲液与你的样品和葡聚糖凝胶相容。




2.样品体积：

不要超过柱子的加载容量。




3.洗脱速度：

保持一个稳定的洗脱速度，避免对柱子造成压力。




4.温度控制：

确保整个过程在适当的温度下进行，以防多糖降解。




百泰派克生物科技——生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务商




相关服务：

多糖的分析方法和过程

多糖鉴定分析

生物药糖谱检测 

O-糖分析服务

N-糖分析服务

鞘糖脂聚糖分析

靶向代谢组学