测胆盐培养基中胆汁酸的含量,菌液怎么前处理?
在测定胆盐培养基中胆汁酸的含量时,菌液的前处理通常包括以下几个步骤,以去除背景噪音并准确测量胆汁酸:
1.收集菌液样本:
使用无菌技术从培养基中收集菌液。
2.离心分离:
使用高速离心机将菌体与菌液进行分离。通常需要在约4°C下,以高速(比如8000-10000 rpm)离心5-10分钟。
3.滤过处理:
使用0.22 µm或更小的滤膜将离心后的上清液进行滤过,去除任何残余的微生物和杂质。
4.萃取胆汁酸:
使用适当的有机溶剂(例如乙醚、氯仿或甲醇)对溶液进行液-液萃取或固相萃取。
5.浓缩样品:
如果需要,通过旋转蒸发或其他方法对样品进行浓缩。
6.重悬液与pH调整:
将处理后的样品重悬于适当的缓冲液中,并调整pH至适合后续分析的水平。
7.储存或直接分析:
根据分析方法的需要,可以将样品存储在低温下或者直接进行分析。
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