多糖过DEAE离子交换层析前,用降低黏度的方法改善过滤效果和速度时盐缓冲液用什么?多离心几次但不抽滤对填料影响大吗?影响可逆吗?
在进行DEAE离子交换层析之前,为了改善多糖溶液的过滤效果和速度,可以使用一些适当的盐类缓冲液来降低多糖溶液的粘度。常用的盐类缓冲液包括磷酸盐缓冲液(PBS),Tris缓冲液等。这些盐类缓冲液可以通过增加溶液的离子强度,从而降低多糖溶液的粘度。需要注意的是,选择的盐类缓冲液应该与后续的离子交换层析步骤兼容,而且不会对多糖的稳定性产生负面影响。
如果在过滤前多次离心,而不进行抽滤,可能会对填料产生影响,主要体现在以下几个方面:
1.填料压实:
多次离心可能会导致填料压实,从而影响层析效果。这种影响可能是可逆的,例如通过适当的洗脱步骤或重新悬浮填料可能可以恢复填料的性能。
2.离子交换效率:
多次离心可能会改变填料的离子交换效率。如果离心过程中丢失了部分填料,那么可能会降低离子交换的效率。这种影响可能是不可逆的。
3.污染风险:
多次离心可能会增加样品受到污染的风险,从而影响层析的效果。这种影响是不可逆的,除非对填料进行适当的洗脱或再生步骤。
因此,在进行DEAE离子交换层析前,应根据具体的实验条件和需求,慎重选择适当的处理方法。如果可能的话,可以考虑使用一种更适合处理多糖溶液的过滤方法,例如使用适合处理粘性溶液的过滤膜,或者使用一种可以降低溶液粘度的处理方法,例如使用适当的盐类缓冲液。
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