请问多糖分子量测定必须要经过纯化吗?
DEAE-52(DEAE-Cellulose 52)是一种阳离子交换树脂,常用于多糖、蛋白质等生物大分子的纯化。在使用DEAE-52进行多糖纯化时,需要考虑以下几个因素来判断树脂用量:
1.样品量:
首先,要评估所需纯化的多糖样品的总量。根据样品量,可以估算所需的树脂用量。一般来说,较大的样品量可能需要更多的树脂来保证足够的结合位点。
2.树脂容量:
DEAE-52树脂的交换容量(即每克树脂可结合的阳离子数量)是一个关键参数。不同生产厂家的DEAE-52树脂交换容量可能有所不同,因此建议查阅产品说明书以获取准确的交换容量信息。根据交换容量和多糖样品的总量,可以计算所需的树脂用量。
3.结合效率:
多糖与DEAE-52树脂的结合效率可能受到多糖的电荷密度、分子量、结构等因素的影响。因此,在实际操作中,可以先进行小规模的实验来评估结合效率。根据实验结果,可以适当调整树脂用量。
4.柱子尺寸:
使用的柱子尺寸也会影响所需的树脂用量。实验中,要保证树脂填充至适当的柱子高度。柱子的内径和高度可以根据实验需要进行选择。
可以初步判断DEAE-52树脂的用量。在实际操作过程中,建议进行小规模的预实验,以便优化操作条件和树脂用量。
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