做肽图用的内切酶"级别选MS级还是测序级别的呢?
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纯度高,经过严格去除核酸酶和蛋白酶杂质。
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适合对下游质谱分析敏感的应用,杂质低。
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通常用于蛋白质组学和精确肽段分析。
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纯度极高,主要针对N端测序和蛋白质序列鉴定。
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杂质几乎为零,但价格高于MS级。
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对肽图的应用通常是过剩的(除非需要极高序列准确性)。
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肽图实验推荐使用MS级内切酶。
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仅当需要进行非常严格的序列验证或特殊分析时才考虑测序级。
针对肽图(peptide mapping)实验,内切酶的选择确实需要考虑纯度和用途。下面来逐步分析:
一、内切酶级别的区别
1、MS级
2、测序级
二、肽图实验的需求
肽图实验主要是:
1、通过特定酶切产生可预测的肽段。
2、上样LC-MS或LC-MS/MS进行肽段检测和序列覆盖率评估。
3、核心要求是酶切特异性和酶活性高,杂质少以免干扰MS信号。
由此可见:
1、MS级酶已经完全满足肽图分析需求。
2、测序级酶通常用于蛋白序列鉴定或极高精度的定序实验,对普通肽图而言成本偏高且无明显优势。
三、结论
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