收集的尿液可以直接-80℃冻存,检测的时候再离心吗?

    可以,但并不总是最优选择。 是否可以直接冻存取决于您的检测目标和对数据精确度的要求。

    以下是详细的专业分析和建议:

    一、直接 -80°C 冻存(检测时再离心)的利弊

    优点:

    1. 操作简便、省时:特别适用于现场采集或样本量巨大的情况。

    2. 避免中间步骤的损失或污染:减少一次离心步骤,理论上减少了因移液等操作造成的目标物损失或污染。

    3. 保存了“全尿液”信息:冻存了尿液中的所有成分,包括可能在未来有分析价值的沉淀物。

    缺点和风险:

    1. 细胞和沉淀物裂解:冷冻过程中,尿液中的细胞(如尿路上皮细胞、白细胞、红细胞)以及不稳定的盐类结晶会因冰晶形成而破裂。这会导致:

    • 细胞内物质释放:细胞内的蛋白质、代谢物、核酸等会释放到尿液中,显著改变这些成分的浓度。

    • 背景噪音增加:释放的物质可能干扰后续检测,特别是对于蛋白质组学、代谢组学分析,这会严重影响数据的真实性和可重复性。

    2. 分析物降解:即使低温下,某些酶活性可能不会立即完全失活,细胞裂解释放的蛋白酶等会降解目标蛋白。

    3. 沉淀物均一化问题:冻融后,沉淀物可能无法通过常规离心完全分离或重新均匀悬浮,导致分装时取样不均,影响检测的重复性。

    4. 离心效果可能变差:经过冻融的样本,沉淀物的物理性质可能改变,影响离心效率。

    二、标准推荐方案:先离心,再分装,再冻存

    对于绝大多数研究,尤其是要求高精度和可重复性的研究(如生物标志物发现、定量蛋白质组/代谢组学),标准操作流程是:

    1. 收集尿液后尽快处理(最好在2小时内,4°C暂存)。

    2. 低温离心(例如:4°C,2000-4000 × g,10分钟)。这一步去除细胞、管型、结晶及其他不溶性沉淀。

    3. 小心吸取上清液(避免触及沉淀),分装到冻存管中。

    4. 立即将分装好的上清液置于 -80°C 冻存。

    5. 检测时,取出所需的一管,解冻,混匀后直接检测或根据需要进行二次离心。

    三、总结与最终建议

    1. 最优选择:为了获得最可靠、可重复的数据,并为未来可能的多种分析保留样本价值,请在冻存前进行离心,并冻存上清液。

    2. 折中方案:如果条件实在有限,必须直接冻存,请务必:

    • 清晰记录处理方法。

    • 保证冻存速度尽可能快(可用液氮预冷或置于-80°C冰箱的金属架上)。

    • 避免反复冻融(务必分装)。

    • 在数据分析时,务必考虑到这种方法可能带来的偏差。

    3. 一致性原则:无论选择哪种方法,在整个研究项目中,对所有样本必须保持处理流程绝对一致,否则不同批次的样本将无法进行比较。

    百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商

     

    相关服务:

    尿液代谢组学

提交需求
姓名 *
联系类型 *
联系方式 *
项目描述
咨询项目 *

 

How to order?


/assets/images/icon/icon-rc2.png

客服咨询

/assets/images/icon/icon-message.png

提交需求

https://file.biotech-pack.com/static/btpk/assets/images/icon/icon-wx-2.png

https://file.biotech-pack.com/pro//bt-btpk/20241231/config/1874015350579343360-WX-20241231.jpg

联系销售人员

/assets/images/icon/icon-tag-sale.png

促销活动

/assets/images/icon/icon-return.png