如果粪便样本需要用来分离微生物、应该怎么保存呢？

若粪便样本用于分离活微生物（如细菌、真菌或厌氧菌等），保存方式需最大程度保持微生物的活性与代表性，关键考虑以下几点：

一、推荐保存策略（按处理时间顺序）

1、立即处理（最优）

• 条件：采集后2小时内处理。

• 操作：现场在无菌条件下进行样本分离培养，尤其适用于厌氧菌。

• 优点：最大程度保持原始微生物多样性与活性。

2、短期冷藏（<24小时）

• 条件：若无法立即处理。

• 保存温度：4°C，避免反复冻融。

• 容器要求：无菌、密封、避光（如螺口冻存管或无菌采样管）。

• 注意事项：不可添加核酸保存液或裂解剂类保存液。

3、中长期保存（>24小时）

• 保存温度：-80°C冻存。

• 冷冻保护剂：

推荐加入10–20%甘油作为低温保护剂，避免冷冻对细胞膜的损伤。

可选方案：用微生物保存珠（cryobeads）或甘油冻存液直接混匀。

• 操作建议：

快速冻存（使用干冰或液氮速冻）可提升后续复苏率。

分装保存，避免多次开盖造成污染或反复冻融。

二、注意事项：

1、勿使用用于宏基因组/代谢组的保存管（如OMNIgene-GUT、MGIEasy、DNA/RNA Shield等），其中含有裂解剂或核酸保护剂，会杀死微生物。

2、若研究特定厌氧菌，需考虑在厌氧条件下采样、运输与培养（可使用厌氧采样管或AnaeroGen厌氧袋等设备）。

3、所用器具应无菌处理，避免外源污染。

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