如果想看一下混合物中有没有肽或者蛋白可以吗?
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目的:初步判断样品中是否存在蛋白质(>5 kDa)。
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局限:不适用于小肽或低丰度蛋白,灵敏度有限。
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目的:直接检测混合物中是否存在特征性肽段(分子量 500–3000 Da)。
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适用于:质谱核心平台快速判断是否存在肽。
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目的:粗略判断蛋白浓度。
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局限:若为小肽或蛋白含量极低,可能检测不到。
可以,但需要明确检测目标和实验条件,以便选择合适的方法。以下是几种常见策略:
一、如果只想判断是否存在蛋白或肽:
快速定性筛查:
1. SDS-PAGE 电泳 + 染色(如 Coomassie 或银染)
2. MALDI-TOF MS 分析(适用于肽段)
3. BCA 或 Bradford 蛋白定量
二、如果想进一步了解蛋白/肽的种类:
LC-MS/MS 蛋白组或肽组鉴定:
1. 前处理:样品蛋白酶消化(如Trypsin)或直接纳入肽段分析。
2. 上机平台:如 Orbitrap、Q Exactive 等。
3. 输出结果:可鉴定出具体蛋白/肽序列。
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