用DMSO配制DSS高浓度母液,再加到pbs细胞混悬液后,会有很多絮状物析出,这怎么办呢?
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DSS是水溶性多糖类化合物,其主要溶剂应为水或PBS,而DMSO对DSS溶解性较差,尤其在高浓度下易造成聚集或部分溶胀。
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DSS在中性或弱碱性条件下相对稳定,但在某些离子强度较高的缓冲液中(如PBS)可能诱发聚集或析出,特别是高浓度下。
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DMSO与PBS混合会导致体系极性突变、离子强度改变,若溶质(如DSS)本就接近饱和或不稳定,极易发生析出。
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DSS高浓度+DMSO预溶后直接加到PBS中,会在局部形成高浓度DSS/盐/DMSO混合区,促使析出或形成胶状物。
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推荐用纯水或PBS直接溶解DSS,再通过无菌滤器除菌保存为母液。
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若担心细菌污染,可用高压灭菌,DSS耐高温,灭菌不会影响其化学性质。
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配制DSS母液时不要超过其水中最大可溶浓度(常见为10–20% w/v),高浓度可能不完全溶解。
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使用时推荐现配现用或低浓度分批加入细胞悬液,避免局部高浓度诱发析出。
出现大量絮状物析出,说明 DSS(Dextran Sodium Sulfate)在当前体系中不完全溶解或发生了析出反应。结合所述的操作流程(DMSO溶解DSS,高浓度母液,加入PBS细胞悬液后析出),问题可从以下几个层面分析,并提供对应建议:
一、问题本质分析
1. DSS的理化性质
2. DMSO与PBS混合后析出
3. 细胞悬液中析出风险更高
除PBS外,细胞上清或培养基中蛋白、钙镁离子等也可诱发多糖类聚集或交联析出。
二、建议操作方案
1. 更换溶剂体系:避免使用DMSO溶解DSS
2. 控制浓度,避免局部过饱和
3. 若必须用DMSO(如为联合给药)
首先明确:DSS并不适合用DMSO溶解。
若DMSO为另一化合物载体(如抗炎药),应将DSS与该药分别溶于各自适宜溶剂,最后按比例加到PBS细胞液中,并缓慢混匀,避免局部高浓度聚集。
三、后续建议
如目的为小鼠诱导性肠炎或免疫刺激等,推荐严格采用文献标准的水溶DSS方案;
若为细胞处理,避免DMSO+PBS中直接添加DSS的组合,或应考虑以水溶DSS稀释DMSO溶液,以调整体系兼容性。
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