请问发酵液放-20℃一段时间还能送扩增子吗？

是否还能用于扩增子测序，需根据以下几个核心因素判断：

一、发酵液保存状态与冻存时间

• -20℃保存通常无法完全抑制微生物酶活性，尤其在反复冻融或保存超过数周后，DNA可能出现降解；

• 若只是短期保存（<1周）且冻存过程迅速、无反复冻融，仍有较大概率可以进行后续提取与扩增；

• 若保存时间较长（>2周）或样品曾经历多次解冻，则需先评估DNA完整性。

二、是否含甘油或保护剂

• 若发酵液加入了甘油或其他冷冻保护剂，细胞结构相对稳定，冻存对微生物DNA影响相对较小；

• 但若直接冻存未加保护剂，细胞在冻结过程中可能裂解，释放的核酸易受降解酶影响。

三、建议操作与质量评估

建议在送扩增子前执行以下步骤：

1、取样提取DNA（常用微生物基因组提取试剂盒）；

2、检测DNA浓度与完整性：

• 使用Nanodrop或Qubit评估浓度；

• 使用琼脂糖凝胶判断是否存在明显降解；

3、如DNA浓度低或降解严重，不建议直接送扩增子建库。

四、补充建议

1、若时间允许，建议重新接种培养再取样，保证样品质量；

2、后续若需长期保存发酵液用于分子实验，建议：

• 加入甘油至最终20%，-80℃保存；

• 或直接提取DNA后保存于-20℃/-80℃备用。

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