请问液氮冻了之后血清还能用来做Elisa吗？

血清如果在未经控速降温保护的情况下直接冻存在液氮中，可能会出现反复冻融或过快降温导致的蛋白质变性、沉淀或活性丧失，从而影响 ELISA 结果。具体判断能否继续用于 ELISA 需结合以下几点：

 

一、样本受损风险分析

1、是否反复冻融

ELISA 对目标蛋白结构和抗原性敏感，反复冻融会导致蛋白变性或降解，显著影响检测信号。

 

2、是否速冻保护

若血清是直接丢入液氮中而未使用如 DMSO 或含有保护剂的冻存管，可能发生冰晶形成，破坏蛋白稳定性。

 

3、观察有无沉淀/混浊

解冻后如发现明显混浊或沉淀，说明蛋白质可能聚集或降解，建议不用于精确定量实验如 ELISA。

 

二、是否还能用于 ELISA 的判断建议

1、尝试小量检测

可先取少量血清做 ELISA 预实验，观察信号强度与背景，评估数据的可靠性。

 

2、检测总蛋白或目标蛋白含量

使用 BCA、Bradford 或 Western blot 验证蛋白完整性，有助于判断 ELISA 是否仍可进行。

 

3、对比新鲜样本

如条件允许，可用同源新鲜血清与液氮冻存样本对比 ELISA 结果，验证其可用性。

 

结论

血清直接冻存于液氮中后是否还能用于 ELISA，取决于蛋白稳定性是否受损。若无明显降解、沉淀，且预实验显示信号正常，仍可尝试使用；否则建议弃用，避免得出偏差结论。

 

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