一批样品已加入Loading Buffer，但尚未进行煮沸变性，目前存放于-20℃。预计将在几周甚至一个月后使用，应该如何保存？

对于已加入Loading Buffer但尚未煮沸变性的蛋白样品，长期保存需权衡蛋白稳定性与后续实验兼容性。具体建议如下：

 

一、推荐保存条件

温度：建议改为-80°C保存，以最大限度减缓蛋白降解与蛋白酶活性。

• 冻存形式：可直接原管冻存，无需分装，但若样品量较大，建议分装成一次用量，避免反复冻融。

• 注意事项：确保冻存过程中避免反复融冻，因含有SDS的Loading Buffer冻融会引起SDS沉淀、样品不均匀及胶上泳动异常。

 

二、使用前处理建议

• 实验当天取用后立即煮沸（95–100°C，5分钟）；

• 若观察到冻存后样品中出现SDS沉淀或分层，可在煮沸前轻轻涡旋混匀或短暂温浴（37–50°C）使其溶解。

 

三、其他补充建议

• 若样品中含有蛋白酶（如未加Protease Inhibitor）或为蛋白质较不稳定的样品类型（如组织裂解液），冷冻前可考虑补加蛋白酶抑制剂。

 

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