IP样品于室温放置近一天（已煮沸），但忘记未取出且夜间仪器已关闭，还能继续使用吗？

需重点考虑以下几点：

一、蛋白完整性

1、已经煮沸（通常含 SDS、还原剂），样品中大部分天然构象和酶活性已被破坏，理论上不会再发生显著降解。

2、但长时间室温暴露可能导致部分易沉淀或不溶的组分聚集，尤其含高浓度 SDS 或尿素时，温度下降后易析出。

 

二、微生物污染与缓冲体系

1、若缓冲液中无抑菌剂（如高浓度 SDS 以外），长时间室温放置仍可能滋生细菌，导致样品混浊或降解。

2、Tris 等缓冲体系在室温下 pH 可能轻微变化，但通常影响不大。

 

三、后续用途决定能否继续用

1、若仅用于 SDS-PAGE/Western blot：基本可继续使用，但建议离心去除可能沉淀，必要时重新煮沸。

2、若需进行酶学实验或质谱（尤其定量质谱）：不建议直接使用，因污染、修饰（氧化、脱酰胺化）风险较高，可能影响数据可靠性。

 

建议处理：

• 先离心检查是否有明显沉淀或浑浊；

• 如仅做 WB，可直接使用或重新煮沸后用；

• 如做质谱或功能实验，建议重新制备，或至少做一份对照以评估影响。

 

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