如果要采样鱼类肠道内容物进行后续筛菌操作，运输途中应该要怎么进行保存呀?

在采集鱼类肠道内容物用于后续筛菌（分离培养微生物）的实验中，运输与保存条件对微生物活性及群落结构至关重要。以下是专业建议，适用于大多数需分离厌氧/兼性菌、好氧菌的微生物学操作场景：

 

运输途中保存的关键原则：

1. 保持低温（4°C）运输，抑制代谢

• 采样后立即放入预冷的无菌离心管或样品袋中，置于冰盒/冰袋中运输；

• 不能冷冻（-20°C 或以下），否则细菌活性可能受损，尤其是需活菌筛选的场景；

 

2. 避免长期暴露在空气中（若筛选厌氧菌）

• 若目标包含厌氧菌，建议使用厌氧采样管（Anaerobe Transport Tube）或充氮气的密闭容器；

• 可使用CO₂厌氧袋/厌氧罐封装；

 

3. 建议添加保护剂（可选）

• 若短时间内无法接种培养，可将内容物混入无菌甘油保护液（10–20% 甘油）中，临时冷藏保存（4°C，<12小时）；

• 或者将样品分装，-80°C 冻存，但此方法适用于菌群DNA/RNA保存，不建议用于筛选活菌；

 

4. 运输时间尽量控制在24小时内

• 运输越快越好，建议采样后立即转运至实验室或培养基地；

• 若距离较远，可使用干冰运输（用于DNA提取/代谢组/扩增子研究），但不适合活菌培养。

 

5. 其他注意事项

• 严禁使用酒精、RNA later 等保存液：这些会抑制/杀灭细菌，适用于宏基因组或代谢组，不适合分离培养；

• 避免反复冻融：若需暂存，必须一次性冻存后快速分装使用；

• 提前准备好无菌耗材与冷链工具：采样前务必准备无菌冻存管、冷藏箱、无菌手套等。

 

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