粪便送代谢组学,取样建议如何?
在进行粪便代谢组学研究时,取样的质量直接影响代谢组学分析的结果,因此在粪便取样时需要遵循一定的规范,以确保样品的代表性和稳定性。以下是一些建议:
1、取样时间与频率
尽量在同一时间段进行取样,尤其是在临床研究或长期跟踪研究中。
对于横断面研究,尽量选择相似的时间段进行样本采集。
频率:如果是进行动态研究或长时间序列分析,建议定期取样,并且尽量保持每次样本采集的时间一致。
2、取样量
(1)样本量:通常建议每次取样大约 1-2克 的粪便样本。样本量过少可能无法提供足够的代谢信息,而过多的样本可能浪费。
(2)取样部位:取样时应避免只从粪便的一部分取样,最好从不同的区域(如前、中、后部)获取样本,确保样本的代表性。
3、取样方法
(1)无菌采样:粪便样本应在无菌条件下收集,避免外界污染。可以使用无菌的采样工具(如无菌铲或采样管)取样,确保样本的纯净。
(2)及时转移:采样后应尽量将样本立即放入合适的储存容器(如冷冻管、采样瓶),并在短时间内转移到合适的冷藏环境中,以保证代谢产物不受环境因素(如温度变化)影响。
4、样品保存
(1)立即冷冻:粪便样本应尽快冷冻,以防止代谢物的降解或微生物的繁殖。最佳做法是将样本立即放入 -80°C 的冰箱中保存。此温度可有效抑制代谢物的变化,避免样本在保存过程中发生化学变化。
(2)短期保存:如果无法立即冷冻样本,可在 4°C 冷藏一段时间,但不超过24小时,因为冷藏条件下,代谢物仍然可能发生变化。
5、样品处理
(1)避免水分丢失:粪便中水分含量较高,保存过程中需要尽量避免样品的干燥或水分流失,否则可能影响代谢产物的检测。
(2)分装与分样:如果样本较大,可以将样品分装成小份,避免反复解冻导致代谢产物的损失。
(3)标准化处理:在取样、冷冻和存储过程中应尽量标准化处理,以减少人为误差对样本结果的影响。
6、相关健康信息
在采样时,最好记录相关的健康信息、饮食习惯、药物使用等,这些因素可能对代谢组学结果产生影响。
7、实验设计
研究中可能需要根据实验设计选择特定的采样时间段或特定的人群样本,以排除环境或生活习惯的干扰。
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