跑液相时，为什么接柱子后在溶剂峰前出现一个小峰？不接柱子跑双通又没有样品峰？

问题总结：

1、接柱子跑样品，在溶剂峰前面出现小峰；

2、溶剂峰反而比样品峰大；

3、不接柱（双通道直通），跑样品和溶剂，均无明显样品峰；

4、样品是购买现成品，自己溶解。

 

分析：

1、首先确定：您的样品本身信号是否存在？

双通（不经过柱子）情况下，直接监测UV或者其他检测器输出，如果样品中有明显可检测组分，应该出现特征峰。

您的情况是双通下样品也无明显峰，说明：
➔ 样品浓度极低；
➔ 或样品在所用检测波长处无吸收（常见于紫外检测）；
➔ 或样品已降解/配制异常。

因此，目前最大可能是：样品本身浓度或状态问题，而非色谱系统或柱子问题。

 

2、其次，为什么接柱后又出现小峰？

柱子内的填料具有吸附/解吸特性，能暂时富集样品中的微量杂质或降解物，导致在溶剂峰前后出现假性小峰。这个小峰不一定是真正的目标化合物峰。溶剂峰过大，说明样品溶解剂的基线贡献远超目标物信号。

 

3、可能的根本原因

 



 

4、建议您的排查步骤

（1）确认检测器设置

检查您当前的检测波长是否适合目标样品。可尝试全波长扫描（190–400 nm），寻找吸收最大波长。

（2）确认样品浓度

重配一个高浓度版本（比如10倍原浓度），直接双通跑，看是否出现峰。

（3）确认样品质量

查阅供货商提供的样品说明书，看是否需要特别处理（如避光、低温、氮气保护等）。

（4）跑标准品对照

如果有条件，拿厂家推荐的标准品或已知样品跑一版，对比。

 

5、特别注意

如果您样品是小分子、代谢物或肽段类化合物，容易降解；
如果您样品是蛋白类，需要注意溶剂条件是否导致沉淀或聚集。

 

百泰派克生物科技--生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务商

 

相关服务：

蛋白质质谱鉴定