请问肠组织不加loading buffer直接放-80可以保存多久?
一、保存稳定性
1、组织整体结构:-80℃条件下未裂解的组织样本(尤其是未加保护剂)理论上可短期稳定保存 数周至数月,但随着时间推移,酶降解、蛋白氧化、RNA降解等风险逐步上升。
2、酶活性/蛋白类分析:若用于后续蛋白组学、WB 等蛋白检测,不加保护剂(如蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂)会在取材和冻结过程中造成蛋白降解,尤其是消化道组织中蛋白水解酶丰富,不建议保存超过 1个月。
3、RNA 分析:若拟用于转录组或qPCR,未经 RNA 抑制剂处理的肠组织即使速冻,RNA 也容易降解;建议保存不超过1周且务必快速液氮冻结避免缓慢冷冻形成冰晶。
二、建议操作
若未来用途尚未确定,建议尽快将组织转入:
1、蛋白实验:加入含抑制剂的裂解液并分装冷冻;
2、RNA 实验:推荐立即用 RNAprotect 等处理后冷冻;
3、长期保存组织结构:可放于 RNAlater 或 OCT 包埋后冷冻。
*注意避免反复冻融,温度波动会导致组织结构破坏、蛋白变性沉淀。
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