WB蛋白裂解完直接放-80和蛋白变性之后放-80哪种更好?
一、推荐判断逻辑
1、若仅做WB,样本可一次性处理完:建议裂解后立即变性并保存,可减少处理步骤,避免重复冻融。
2、若需多次加样、可能用于IP或其他分析:建议裂解并分装后直接-80℃保存,每次使用前按需取样变性。
二、注意事项
1、无论哪种方式,裂解液中务必含蛋白酶抑制剂并操作快速低温以减少降解。
2、保存前应确认蛋白浓度已定量,避免后续误差。
3、变性后的样品不宜长期保存,尽量在1个月内使用完毕,否则可能出现SDS变性失效、蛋白聚集。
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