请问SDS-PAGE上样时可以上不同的吗，还是一个胶板都要一样的？

SDS-PAGE上样时每个泳道可加载不同样本，实验设计上无须整块胶板样本完全一致，但为确保条带可比性与数据可靠性，需严格控制蛋白量、样品处理条件与加载体积的一致性，同时设置适当对照和Marker以便结果判读。合理规划样品布局是获得清晰、可解释电泳结果的关键。

 

一、技术允许性

泳道之间彼此独立，互不干扰，可以分别加不同的蛋白样本，例如：

1、不同处理组（e.g., Control vs. Treatment）；

2、不同细胞类型或组织；

3、同一样本的不同裂解条件或分级组分；

4、蛋白标准（Marker）与未知样本等。

 

二、实验设计建议

1、确保样本浓度一致或经定量校正

每个泳道加载等量蛋白（如20 µg/10 µL），避免泳带深浅差异影响对比。

 

2、样品缓冲液（Loading Buffer）一致，处理方式一致

不同组样本应使用相同的SDS Loading Buffer、相同的煮样温度与时间（如95℃, 5 min），确保经过相同的变性处理（如还原剂处理），蛋白变性程度一致。

 

3、样品体积一致，避免泳道加载不匀

控制在每孔适宜体积（一般10–20 µL），防止泳带畸形或弥散。

 

4、设置适当的对照和Marker

建议边缘泳道上样Marker，便于判读分子量；中间可设计重复样本或阳性对照，提高实验一致性判断。

 

三、特殊注意

1、若要在同一块胶上比较不同样本间某一蛋白表达量，确保样品加载一致性尤其关键；

2、若样品类型差异极大（如细胞 vs. 组织提取物），可考虑分别跑胶或使用双通道染色增强比较准确性。

 

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